viernes, 26 de mayo de 2017

Determinación de la expresión de proteínas por WESTERN BLOT en enfermedades isquémicas de corazón

Tema: Modificaciones en el nivel de expresión de proteínas asociadas con el metabolismo energético en ventrículo izquierdo de ratas obesas e hipertensas

Objetivo: Determinar si el aumento del peso corporal podría afectar los requerimientos energéticos del corazón y ser causa de la modificación en la expresión de proteínas relacionadas con el metabolismo energético. 

Muestra: ventrículos izquierdos de ratas WKY macho y ratas SHR

Tipo de molécula: proteinas

Extracción:

           Lisis: tejidos homogeneizados se solubilizaron en buffer Laemmli que contiene 2-mercaptoetanol
           Separación: proteínas se separaron en geles desnaturalizantes de poliacrilamida y SDS al 15%
           Purificación: ácido bicintiónico

Proteínas a identificar: proteínas triosafosfato isomerasa, fructosa 1,6 bifosfato aldolasa, malato deshidrogenasa, NADH deshidrogenasa y la α-ATP sintasa mitocondrial

Tipo de prueba: WESTERN BLOT

Visualización: Las proteínas se detectaron por quimioluminiscencia mejorada y evaluadas por densitometría

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